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草苁蓉中多糖含量的测定

 

草苁蓉为一种寄生物,常随寄主生于岩石缝隙或陡峭的山坡上,具耐寒、耐瘠薄的特性,其含有的多糖成分是一种很好的中药制剂,因此,有必要对其多糖含量进行必要的测定。本文将从试样的制备、多糖含量的检测以及结果探讨等三部分进行阐述。

一、试样的制备

  • 对照品葡萄糖溶液的制备: 称取干燥的对照品葡萄糖25mg,放置250ML。容量瓶中,加水定容至刻度、摇匀,即得每1mL中含无水葡萄糖0.1006mg。
  • 测定波长的选择: 取对照品葡萄糖溶液经显色后在460~500nm波长范围进行吸收度的测定,溶液在波长490nm有最大吸收,故选择490nm作为检测波长。
  • 标准曲线的制备: 精密量取对照品葡萄糖溶液0.1mL、0.3mL、0.5mL、0.7mL、0.9mL。放入10mL具有塞试管中,加水至lmL。分别加人5%苯酚试液lmL、浓硫酸5mL,摇匀后放置10min后,在40℃水浴锅中加热10min,再放置10min。以相应的试剂为空白,在490nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标.绘制标准曲线。

二、草苁蓉样品溶液的测定法

  1. 精密称取干燥的草苁蓉粉末0.2g,放置250mL具寒三角瓶中,依次用石油醚60~90℃ 20mL、乙醇20mL超声提取30min,残渣中挥发干溶剂后。
  2. 再加水超声提取2次,每次20mL,30min过,滤后合并2次水提液,再减压浓缩至20mL。
  3. 加乙醇至含醇量约85%,密闭静置24h,抽滤,滤饼用70%乙醇洗涤3次。
  4. 在60℃水浴锅中加热挥尽乙醇残留物用水在60℃水浴锅中加热溶解。
  5. 定容至5mL量瓶中,得多糖溶液,取1mL多糖溶液定容至5mL量瓶中。
  6. 取1mL置10mL具有塞试管中,选择测定波长和制备的标准曲线方法测定吸光度。
  7. 按标准曲线计算出供试品溶液中含葡萄糖的浓度(mg/mL)。
  8. 取长白山、黑龙江呼玛、内蒙古呼伦贝尔盟额尔古纳左旗的草苁蓉药材,分别草苁蓉样品溶液的测定的方法处理并测定,用可见分光光度计测定,结果分别为15.8、12.7、13.6。

三、结果与讨论

为保证草苁蓉中多糖成分能被全部提净,在实验过程中提取次数、溶媒用莓进行了详细考察。所采用硫酸一苯酚法测定多糖含量时,配制的苯酚需要放在冰箱里,以防止苯酚在温度较高和光照时氧化。长白山、黑龙江呼玛、内蒙古呼伦贝尔盟额尔古纳左旗的草苁蓉中含有多糖类化合物的含量不同。

用分光光度计测定长白山草苁蓉中多糖测定简便,测定结果准确可靠,为草苁蓉的多糖含量评估提供了化学分析方法。

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